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來自結直腸癌的病人類器官原代培養

更新時間:2023-04-19      點擊次數:277
一、操作步驟

1.組織 4℃ 條件下從醫院取回。
2.消毒取樣的 15ml 管,取出組織,放到 10ml 大皿中。
3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡,清洗組織。
4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。
5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊,轉移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴鍋中,消化 15min。
7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細胞和較少的細胞簇后,終止消化。
8.用 100μm 篩過濾,然后 300g4℃ 離心 5min,移去上清。
9.重懸沉淀,轉移到 2ml 離心管中,300g4℃ 離心 5min,移去上清。
10.估算沉淀的細胞量,以 1:25 的比例添加基質膠,重懸。
11.24 孔板鋪板,冰上操作,每孔點膠 25ul。
12.鋪板后,放到 37℃ 細胞培養箱中 15min 成膠。

13.然后每孔添加 600ul 結直腸癌類器官培養基,放到 37℃ 細胞培養箱中。


二、結果展示

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